宫颈癌中P53及PTEN蛋白的表达及意义

　　作者：叶霞 王丽宏 陈 玲 作者单位：阳泉煤业集团总医院

　　【摘要】 目的：探讨P53及PTEN蛋白的异常表达在宫颈癌发病中的作用及临床意义。方法：免疫组织化学检测40例宫颈癌和15例慢性宫颈炎组织P53及PTEN蛋白的表达情况。结果：宫颈癌与慢性宫颈炎组，P53蛋白阳性表达率为70.00%(28/40)和13.33%(2/15)，差异显著(P<0.05);PTEN蛋白阳性表达率为62.50%(25/40)和26.66%(4/15)，差异显著(P<0.05)。宫颈癌P53蛋白表达阳性组与阴性组，PTEN蛋白的阳性表达率分别为60.71%(17/28)、58.33%(7/12)，差异不显著(P>0.05)。结论：宫颈癌的发病过程中伴有P53及PTEN蛋白表达上调，但两者高表达机制各自独立。两种蛋白联合检测有助于临床宫颈癌的预测和诊断。

　　【关键词】 宫颈癌;P53;PTEN;免疫组织化学

　　Abnormal Expressions of P53 and PTEN Protein in Cervical Carcinoma

　　Ye Xia，Wang Lihong,Chen Ling

　　Department of Pathology,Yangquan Mineral General Hospital

　　Abstract Objective:To study the significance of abnormal expressions of P53 and PTEN protein in cervical carcinogenesis.Methods:Immunohistochemistry method was used to detect the expressions of P53 and PTEN protein in 40 cervical carcinomas and 15 chronic cervicitises.Results:The protein expression rates of P53 in cervical carcinoma group being 70.00% was higher than that in chronic cervicitis group being 13.33%(P<0.05);the rates of PTEN in cervical carcinoma group being 62.50% was higher than that in chronic cervicitis group being 26.66%(P<0.05).In cervical carcinoma with the P53 expression and without the P53 expression,the protein expression rates of PTEN were 60.71%,58.33% respectively,which was not significantly different(P>0.05).Conclusion:Following the cervical carcinogenesis,expressions of P53 and PTEN protein increase with independent mechanisms.Detecting expressions of two proteins at the same time may help predict and diagnose cervical carcinoma.

　　Key words Cervical carcinoma;P53;PTEN;Immunohistochemistry

　　宫颈癌是我国女性生殖道发病率最高的恶性肿瘤，其发病机制目前尚不清楚。有关肿瘤最初的研究表明肿瘤的发生与癌基因的激活有关。但后来的研究却发现抑癌基因的失活在很多肿瘤的发生过程中起主导作用。P53、PTEN是研究较为广泛的两种抑癌基因，现已证实两者功能丧失是许多肿瘤发生的重要致病因素。本文通过比较P53及PTEN蛋白在宫颈癌和慢性宫颈炎组织的表达情况，探讨P53及PTEN蛋白在宫颈癌发病中的作用及临床意义。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料

　　收集本院2004年1月～2007年12月手术切除及宫颈活检鳞癌标本40例，患者年龄28岁～61岁，平均43.54岁;慢性宫颈炎15例，患者年龄26岁～70岁，平均41.34岁。

　　1.2 主要试剂

　　抗P53单克隆抗体(北京中杉生物技术有限公司);抗PTEN单克隆抗体(北京中杉生物技术有限公司);免疫组化试剂盒(购自北京中杉生物技术有限公司);DAB显色试剂盒(购自福州迈新公司)。

　　1.3 方法

　　P53、PTEN蛋白采用免疫组织化学法检测。标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，4.5 μm切片，脱腊，3%双氧水阻断内源性过氧化物酶，抗原微波修复，非免疫羊血清封闭，加一抗，湿盒中4 ℃过夜，再加二抗，加辣根过氧化物酶，DAB显色，复染，脱水，封片。用已知P53、PTEN蛋白阳性标本切片作阳性对照，PBS作阴性对照。

　　1.4 结果判断

　　突变型P53、PTEN蛋白均以细胞内出现棕黄色颗粒判断为阳性，每例切片随机计数500个以上上皮细胞：阳性细胞数≥10%为阳性;阳性细胞数<10%为阴性。

　　1.5 统计学分析

　　采用χ2检验，所有数据用SPSS13.0统计软件处理。

　　2 结果

　　2.1. 宫颈癌及慢性宫颈炎P53、PTEN蛋白的表达情况

　　宫颈癌与慢性宫颈炎组织中P53与PTEN蛋白的表达情况见表1。宫颈癌组P53、PTEN蛋白的阳性表达率均明显高于慢性宫颈炎组(P<0.05)。表1 不同病变宫颈组织P53、PTEN蛋白的表达情况

　　2.2. 宫颈癌P53、PTEN蛋白表达的关系

　　宫颈癌P53蛋白阳性组与阴性组中，PTEN蛋白表达率为60.71%(18/28)和58.33%(7/12)，无显著差异(P>0.05)。

　　3 讨论

　　P53基因是重要的抑癌基因，定位于染色体17P13.1，编码的野生型P53蛋白调节转录，对细胞增殖起抑制作用，但由于其半衰期短，一般不能检测到。相反突变型P53蛋白有促进细胞恶性转化的作用，它的半衰期长可以被检出[1]。本研究结果显示宫颈癌P53蛋白表达率为70.00%,明显高于慢性宫颈炎的13.33%，表明突变P53蛋白在促进宫颈黏膜上皮细胞恶性转化过程中起一定作用。这一结果与许多研究结果是一致的，提示在临床检测P53蛋白的表达可以用于预测宫颈癌和辅助诊断宫颈癌[2，3]。

　　PTEN基因编码403个氨基酸组成的位于胞质的蛋白酪氨酸磷酸酶，其能使蛋白中的酪氨酸去磷酸化，从而抑制细胞生长[4]。Tamura等[5]发现PTEN蛋白对细胞迁移、铺展、局灶黏附活动有抑制作用，认为PTEN可能也是抑制肿瘤侵袭、转移的基因。故PTEN基因的缺失、突变或表达产物的失活等均可影响肿瘤的发生及发展。本研究发现宫颈癌组PTEN蛋白表达率明显高于慢性宫颈炎组，与有关宫颈癌PTEN基因突变编码蛋白表达下调的报道不相符[6]。PTEN蛋白在宫颈癌中表达的情况不一致，可能是由于不同机制导致的。我们研究中发现PTEN蛋白的高表达是不是细胞发挥抑癌功能的代偿作用，将在进一步对PTEN基因表达状况进行研究后得到证实。

　　研究中发现宫颈癌组两种蛋白的表达没有明显相关关系。两者的异常表达在宫颈癌的发生发展中可能是相互独立的因素。

　　综上所述，宫颈癌的发生过程中伴有P53及PTEN蛋白的高表达。两种蛋白联合检测有助于临床预测和诊断宫颈癌。

　　【参考文献】

　　[1] 孙 军,夏和顺,陈 璐,等.Bcl-2,P53在宫颈鳞状上皮不典型增生、鳞状上皮癌中表达及意义[J].中国肿瘤临床与康复,2001,8(1):13～16.

　　[2] 赵温利,温培娥,崔树龄,等.人乳头状癌病毒感染、P53基因突变与宫颈癌的相关性研究[J].山东医科大学学报,1998,3(1):1.

　　[3] 赵蔚明,司静懿,李 昆,等.子宫颈癌P53抑癌基因突变与病毒感染的研究[J].中华妇产科杂志,1995,30(11):654.

　　[4] Gu J,Tamura M,Yamada KW.Tumor suppressor PTEN inhibits integrin-and growth factor-mediated mitogen-activated protein(MAP)kinase signaling pathways[J].J Cell Biol,1998,143(5):1　375～1　383.

　　[5] Tamura M,Cu J,Matsumdo K,et al.Frihitition of cell migrationspreading,and focal adhesions by tumor suppressor PTEN[J].Sience,1998,280(5 369):1　614～1　617.

　　[6] Yaginuma Y,Yamashita T,Ishiya T,et al.Abnomal structure and expression of PTEN/MMAC1 gene in human uterine cancers[J].Gynecol Oncol,2000,76(2)：193～199.