sVCAM-1在妊娠期肝内胆汁淤积症患者血清中的表达

　　作者：方彩云,方艳梅, 郭立丽 作者单位：郧阳医学院附属太和医院妇产科，湖北 十堰 442000

　　【摘要】目的:探讨可溶性血管细胞粘附分子1(soluble vascular cell adhesion molecule-l, sVCAM-1)在妊娠肝内胆汁淤积症(Intrahepatic cholestasis of pregnancy, ICP)发病中的作用。方法： 酶联免疫吸附法(ELISA)测定49例孕妇血清中sVCAM-1水平。结果： 重型ICP组血清中sVCAM-1水平显著高于正常妊娠组(P<0.01)， ICP组随着病情的加重该指标升高，差异有统计学意义(P<0.01); 产后该项指标下降与正常妊娠组无显著性差异(P>0.05);sVCAM-1的升高与胆汁酸(TBA)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)呈正相关(P<0.01，P<0.05)。 结论：粘附分子的异常表达可能是ICP发病机制的一个重要环节。

　　【关键词】 妊娠肝内胆汁淤积症; 血管细胞粘附分子1

　　Expressina of Soluble Vascular Cell Adhesion Molecule-l in the Pathogenesis of Intrahepatic Cholestasis of Pregnancy

　　FANG Cai-yun, FANG Yan-mei, GUO Li-li

　　(Department of Gynaecology and Obstetrics, Taihe Hospital, Yunyang Medical College, Shiyan,Hubei 44200，China)

　　Abstract：Objective To investigate the role of serum soluble vascular cell adhesion molecule-l( sVCAM-1) in the pathogenesis of intrahepatic cholestasis of pregnancy(ICP). Methods The serum sVCAM-1 levels were determined in 49 by ELISA. Results The level of serum sVCAM-1 was significantly elevated in women with mild and severe ICP compared with control subjects(P<0.01), and it markedly decreased 5 days after delivery, with no significant difference compared with control subjects(P>0.05). The levels of sVCAM-1 from women with ICP had a significant positive correlation with total bile acid(TBA), alanine aminotransferase(ALT) and aspartate aminotransferase(AST)(P<0.01 and P<0.05,respectively). Conclusion The abnormal expression of adlesion molecule may play an important role in the pathogenesis of ICP.

　　Key words： Intrahepatic cholestasis of pregnancy(ICP); Soluble vascular cell adhesion molecule-l

　　妊娠肝内胆汁淤积症(Intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)是发生于妊娠中晚期，以皮肤瘙痒、黄疸、胆汁酸(TBA)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)轻到中度升高，产后症状迅速消失为特征的妊娠期并发症，因易引起胎儿窘迫、早产、死胎、死产而被列为高危妊娠之一。其病因目前仍不明确。最近国内外大量研究表明，ICP的发生与免疫功能的改变有关[1]。可溶性血管细胞粘附分子1(soluble vascular cell adhesion molecule-l,sVCAM-1)的含量改变是抗免疫反应的结果。本研究通过测定ICP患者血清中可溶性血管细胞粘附分子-1水平作自身对照及与正常妊娠组对照，以探讨其在ICP发病中的作用。

　　1 资料与方法

　　1.1 研究对象

　　选择2006年1月-2007年9月在我院收治ICP患者34例(ICP组)：其中轻型ICP14例、重型20例，ICP的诊断参照文献[2]、临床分度标准[3]。轻度：血清胆红素<21 μmol/L，直接胆红素<6 μmol/L，血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)<250 u/L，血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)<250 u/L;重度：血清胆红素>21 μmol/L，直接胆红素>6 μmol/L，ALT> 250 u/L，AST>250 u/L。平均年龄(26.94±2.74)岁，平均孕周(36.13±2.02)周。正常孕妇15例，平均年龄(27.93±3.86)岁，平均孕周(39.34±0.96)周。所有研究对象均无内外科合并症，所有病例均在临产前行剖宫产术。

　　1.2 研究方法

　　1.2.1 标本的采集与处理：抽取所有对象清晨空腹肘静脉血5 mL于干净玻璃试管内，室温下放置20 min后以3 000 r/min离心15 min，取上清液，于-70 ℃保存待测，产后5 d再抽肘静脉血5 mL处理同前。

　　1.2.2 sVCAM-1的测定： sVCAM-1的测定用ELISA法，试剂盒由美国 ENDOGEN公司提供。具体操作步骤严格按照试剂盒操作说明进行。

　　1.2.3 TBA、ALT、AST的测定：由我院日立7170型全自动生化分析仪进行测定。

　　1.3 统计学处理

　　所测数据采用SPSS11.0统计软件进行处理，统计学分析采用t检验、方差分析和直线相关分析。

　　2 结果

　　2.1 sVCAM-1指标的变化

　　重度ICP患者血清中sVCAM-1显著高于正常妊娠组(P<0.01)，重型ICP组该项指标产前、产后相比差异有统计学意义(P<0.01)，而正常妊娠组无显著性改变。ICP组随着病情的加重该指标升高，差异有统计学意义(P<0.01)，ICP组产后该指标下降与正常妊娠组无统计学意义(P>0.05)，见表1。

　　2.2 不同程度ICP组TBA、ALT、AST与母血sVCAM-1的相关性

　　本研究表明不同程度ICP患者的TBA、ALT、AST与母血sVCAM-1呈正相关(P<0.01，P<0.05)，见表2。

　　3 讨论

　　sVCAM-1(CD106)属于免疫球蛋白超家族(im munoglobulin superfaimly)， 广泛分布于细胞因子活化的内皮细胞表面、上皮细胞、单核巨噬细胞和树突状细胞表面，分子量100~110 Kda，可由白细胞介素-6(IL-6)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF- α) 、γ-干扰素等诱导表达，其配体为整合素a4/b1和a4/b7[4]。生物学作用主要是与自然杀伤(NK)细胞和单核细胞表面的极迟活化相关抗原-4(VLA-4)结合，介导这些细胞的粘附和迁移、参与炎症反应和免疫过程，作为刺激分子能增加B7细胞对静止性细胞的增殖作用[5]。正常人血液中sVCAM-1含量极低，但在免疫疾病中含量明显增高，对胚胎着床以及妊娠并发症的研究发现，sVCAM-1的表达紊乱，可导致胚胎的早期死亡、妊高征及早产发生[6]。

　　本研究发现重型ICP患者血清中sVCAM-1水平显著高于正常妊娠及轻型ICP患者，随着病情的加重，血清中sVCAM-1表达增强，导致大量白细胞与内皮细胞粘附，一旦中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞等粘附到血管内皮，通过一系列机制导致血管功能障碍和组织损伤：①白细胞与内皮粘附后，释放趋化因子如IL-1，TNF，PAF和LTB4等，吸引其他更多的白细胞和血小板粘附于内皮，导致微循环阻塞、形成缺血-炎症的恶性循环;②粘附和激活的白细胞释放氧自由基，后者能氧化、修饰低密度脂蛋白(LDL)形成OX-LDL具有细胞毒作用，可选择性地作用于细胞周期的S期，损伤血管内皮细胞和平滑肌细胞，使内皮细胞脱落、坏死;它还能抑制内皮细胞和血小板合成前列环素(PGI2)，促进血栓素(TXA2)生成，破坏PGI2/TXA2平衡，导致血小板聚集，造成相应病理生理改变;氧自由基还能灭活内皮细胞衍生的松弛因子或使血管内皮细胞松驰因子的基础分泌减少，导致血管舒张功能障碍;③白细胞活化后还可通过“呼吸爆发”产生大量氧自由基及过氧化氢等激活血小板，加重对内皮细胞的损伤[7]。最终导致肝脏受损、胎儿宫内生长受限、胎儿窘迫、严重者胎死宫内、死产，影响母儿安全。故粘附分子的异常升高，标志着血管内皮损伤及功能障碍。本研究还发现，胎儿出生后5 d，两组患者血清中sVCAM-1水平无显著差异，表明当移植物胎儿娩出后母体自身免疫平衡恢复，从而证明免疫因素参与ICP的发生、发展。

　　妊娠期肝内胆汁淤积系肝细胞对胆汁摄入、合成及分泌障碍所致。在临床上表现为TBA、ALT、AST升高。尽管其机理不清，但研究表明，肝细胞膜成份及结构不正常是胆汁淤积的主要原因[8]。正常人肝组织的肝细胞缺乏sVCAM-1的表达，仅在肝窦状隙膜内皮细胞有微弱的表达，当受到刺激时，肝细胞膜的sVCAM-1表达增强。研究表明，sVCAM-1的水平变化与肝细胞炎症、肝细胞坏死和肝功能受损程度有关[9]。 sVCAM-1增高介导嗜酸性粒细胞与肝窦状隙内皮粘附，并向肝内浸润，参与免疫反应而至肝损伤。本研究表明ICP组的sVCAM-1与TBA、ALT、AST具有相关性，sVCAM-1与肝内胆汁淤积、肝功能损害有关，其浓度的高低亦放映了患者的肝功能受损程度及其病情。

　　sVCAM-1异常表达在ICP 发病机理中起重要作用，而粘附分子介导的白细胞与内皮细胞的粘附可能是发病的中心环节。通过监测血清中sVCAM-1的浓度，可以了解病情的严重程度;产后检测患者血中sVCAM-1的水平可以判断预后情况。如果能控制血清中sVCAM-1的产生及抗粘附作用可为ICP的治疗开辟新的领域，但如何控制则有待进一步研究。

　　【参考文献】

　　[1]殷艳，王冬梅.妊娠期肝内胆汁淤积症的免疫学研究进展[J].医学综述，2005，11(2):165-167.

　　[2]曹泽毅.中华妇产学[M]，第二版,北京：人民卫生出版社，2 005：472-473.

　　[3]漆洪波，绍勇，吴味辛，等.妊娠肝内胆汁淤积症分度诊断和处理的临床意义[J].中华妇产科杂志，2004，39(1)：14-17.

　　[4]卢玉莲，郝淑维.可溶性粘附分子与妊娠高血压综合征[J].国外医学妇产科分册,2002,29(1):21-23.

　　[5] 龚非力，主编.医学免疫学[M].北京：科学出版社，2000，116.

　　[6] Kunkel S, Briese V, Rohde E , et al. Investigation of adhesion molecules(sVCAM-1) in serum of nonpregnant women,normotensive pregnant women and in patients with pregnancy complications[J]. Zentralbl Gynakol,1999,12(9):426-429.

　　[7]王立杰，潘立梅，戴昊笙.粘附分子与妊高征[J]. 现代妇产科进展，2001,10(2)：132-134.

　　[8]Austgulen R,Lien E, Vince G, et al. Increased maternal plasma levels of soluble adhesion molecules(ICAM-1,VCAM-1,E-selectin)in preeclampsia[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol,1997,71(1):53-58.

　　[9]Schreiber AJ,Simon FR.Estrogen-induced cholestasis:clues to pathogenesis and treatment[J].Hepatology,1983,3(4):607- 613.