发表时间:2010-06-08 浏览次数:490次
RNAi;转化生长因子β1;质粒载体
王翔,胡治平,周为军
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知网,万方
目的 构建人转化生长因子β1(TGFβ1)基因RNAi质粒载体。方法 根据人TGFβ1 mRNA序列选择3个靶序列并设计合成相应3对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列;将以上4对寡核苷酸序列退火后连入pRNAU6.2/Lenti质粒并分别命名为pRNAU6.2/Lenti1、pRNAU6.2/Lenti2、pRNAU6.2/Lenti3、pRNAU6.2/Lenti4。酶切和测序鉴定后,将以上重组质粒转染Hela细胞,运用RTPCR和ELISA检测TGFβ1 mRNA和蛋